今天养殖艺技术网的小编给各位分享凝胶试剂配置标准有哪些的养殖知识,其中也会对SDS-PAGE凝胶过程的具体操作步骤?以及胶体的具体配置?(sds-page凝胶浓度选择)进行专业解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在我们开始吧!
SDS-PAGE凝胶过程的具体操作步骤?以及胶体的具体配置?
操作步骤都大同小异的,网上有很多学习视频
http://v.youku***m/v_show/id_XMjIyNzAyNzEy.html
低熔点琼脂糖凝胶怎么配制?
你好,琼脂糖凝胶的配制是分子实验室比较基本的操作,因此正确地操作对整个实验来讲很有必要,大体流程如下:称量、熔胶、倒胶、拔梳。
1.称量
我们通常所说的0.8%、1%的胶都是指的质量体积分数,即所称取的琼脂糖粉的质量(g)比所加的tbe缓冲液的体积(ml)即胶的浓度。缓冲液的体积根据胶板的大小而定。如小胶板0.8%的胶需要琼脂粉0.104g,tbe13ml。
2.熔胶
将所称量的琼脂粉与tbe在锥形瓶中混合,在微波炉内反复加热2~3次至琼脂粉溶解并无气泡。
3.倒胶
干净的胶槽内摆好梳子,往胶内滴加1ul左右核酸染料,混匀,待**至不烫手,轻轻倒入胶板内。
4.拔梳.待大约20min后,轻轻拔掉梳子(若不好拔,可以滴加适量的tbe缓冲液)。
低熔点琼脂糖凝胶怎么配制?
你好,琼脂糖凝胶的配制是分子实验室比较基本的操作,因此正确地操作对整个实验来讲很有必要,大体流程如下:称量、熔胶、倒胶、拔梳。
1.称量
我们通常所说的0.8%、1%的胶都是指的质量体积分数,即所称取的琼脂糖粉的质量(g)比所加的tbe缓冲液的体积(ml)即胶的浓度。缓冲液的体积根据胶板的大小而定。如小胶板0.8%的胶需要琼脂粉0.104g,tbe13ml。
2.熔胶
将所称量的琼脂粉与tbe在锥形瓶中混合,在微波炉内反复加热2~3次至琼脂粉溶解并无气泡。
3.倒胶
干净的胶槽内摆好梳子,往胶内滴加1ul左右核酸染料,混匀,待**至不烫手,轻轻倒入胶板内。
4.拔梳.待大约20min后,轻轻拔掉梳子(若不好拔,可以滴加适量的tbe缓冲液)。
琼脂糖凝胶怎么配制?
把琼脂糖,即几乎不含硫酸根的主要成分为多糖的琼脂,溶于热水,倒入玻璃杯中,**制成的凝胶。融化后在37°C下可维持液态数小时,30°C时凝固成胶。即完成琼脂糖凝胶的配置。
制成的小颗粒用于凝胶过滤,适于用sephadex不能分级分离的大分子的凝胶过滤,若使用5%以下浓度的凝胶,也能够分级分离细胞颗粒、**等。利用其吸附性小的特点,有时用它代替琼脂、以作为免疫电泳或凝胶内沉降反应的支持物。
扩展资料:
琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂糖,琼脂糖的熔点在62〜65°C之间,多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DN**段回收。琼脂糖凝胶由于孔径大常用于大分子蛋白质、DNA的分离。
琼脂由琼脂糖和琼脂果胶两部分组成:
作为胶凝剂的琼脂糖是不含硫酸酯的非离子型多糖,是形成凝胶的组分,其大分子链链节着1,3苷键交替相连的β-D-半*糖残基和3,6-内醚-L-半*糖残基 。而琼脂果胶是非凝胶部分,是带有硫酸酯、葡萄糖醛酸和**酸醛的复杂多糖,也是商业提取中力图去掉的部分。
商品琼脂一般带有2%~7%的硫酸酯,0%~3%的**酸醛及1%~3%的甲乙基。在工业上的琼脂 色泽由白到微黄,具有胶质感,无气味或有轻微的特征性气味,琼脂不溶于冷水,易溶于沸水。
琼脂系选用优质天然石花菜、江蓠菜、紫菜等海藻为原料,采用科学方法精炼提纯的天然高分子多糖物质。
琼脂为亲水性胶体,分有条状和粉末状,不溶于冷水,易溶于热水。琼脂在工业上具有独特的重要性,琼脂的浓度即使低至1%仍能形成相当稳定的凝胶,是食品工业、化学工业、医学科研所必需之原料。
参考资料来源:百度百科-琼脂糖凝胶
参考资料来源:百度百科-琼脂
变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中胶的制备需要哪些必备药品?变性剂是什么?还有用水平电泳可以吗?
你好。
需要准备的有:
蒸馏水
30%丙烯酰胺/双丙烯酰胺
Tris-Hcl(浓缩胶和分离胶的PH不一样)
10%SDS
10%AP
TEMED
变性剂是SDS
我们用的是垂直电泳,水平电泳我也不是很清楚。
低熔点琼脂糖凝胶怎么配制?
搜索了很久终于找到啦!哈哈!不要太感谢哥哈!1. 琼脂糖凝胶的制备⑴琼脂糖凝胶的制备:称取0.3g琼脂糖,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE缓液,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE缓液,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE缓液,将该三角瓶置于微波炉加热至琼脂糖溶解。将**至65℃左右的琼脂糖凝胶液,加入溴化乙锭,充分混匀。⑵胶板的制备:①取有机玻璃内槽,洗净、晾干;②将有机玻璃内槽置于一水平位置模具上,安好挡板,放好梳子。吸取少量琼脂糖溶液封固胶膜边缘,任其凝固,在距离底板0.5~1.0mm的位置上放置梳子,以便加入琼脂糖后可以形成完好的加样孔。如果梳子距离玻璃板再近,则拔出梳子时孔底将有破裂的危险,破裂后将使样品在凝胶与玻璃板之间渗漏。③将剩余的温热琼脂糖溶液倒入胶膜中,使胶液缓慢地展开,直到在整个有机玻璃板表面形成均匀的胶层。凝胶的厚度在3~5mm之间,检查一下梳子的齿下或齿间是否有气泡。 ④室温下静置30min左右,待凝固完全后,轻轻拔出梳子,在胶板上即形成相互隔开的上样孔。制好胶后将铺胶的有机玻璃内槽放在含有0.5~1×TAE(Tris-乙酸) 或TBE(Tris-硼酸)工作液的电泳槽中使用,没过胶面1mm以上。(注:溴化乙锭是一种强烈的诱变剂并有中度毒性。使用含有该染料的溶液时必须戴手套。使用完后应该进行净化处理。通常用水配制成10mg/ml的贮存液在室温下避光储存,使用终浓度为0.5μg/ml。)