鲍的多倍体[多倍体:英文名称:polyploid 体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体.多倍体在生物界广泛存在,常见于高等植物中,由于染色体组来源不同,可分为同源多倍体和异源多倍体。]育种[yùzhǒng 育种 breeding 通过创造遗传变异、改良遗传特性,以培育优良动植物新品种的技术。]技术是一种改变鲍遗传基因倍数,保留、放大优良性状的育种新技术。20世纪80年代中期,大连水产学院王子臣教授等为改变我国鲍经过多年养殖品质下降、病害频发的状况,采用生物、化学、物理等多种方法诱导[1. [Guide;Lead;Induce;Lure]∶劝诱;引导2. “诱导”后面接行为动词或者新闻短语。]鲍产生多倍体并获得成功。目前鲍三倍体的诱导率可达67%,到2001年已生产数百亿粒三倍体[遗传学名词,含有三组染色体的细胞或生物。]苗,在世界上率先实现了鲍多倍体苗种的规模化生产。同时,鲍四倍体的诱导率业已达到50%。鲍的多倍体个体具有生长速度快、抗病力强、个体大等优点,具有明显的增产效果,极具推广价值。下面笔者简略介绍一下获得鲍多倍体的三种技术方法,供广大养殖户、特别是鲍育种生产户参考。
1.水压法
以皱纹盘鲍的受精[受精,指卵子和**融合为一个合子(受精卵)过程,是有性生殖的基本特征,普遍存在于动植物界。]卵为例:在卵受精后7分钟[分钟表示时间长度的词语,一分钟等于60秒。]及22分钟用200千克/平方厘米[平方厘米是一种通用数学计算单位、面积单位。]的静水压力[静水压力由均质流体作用于一个物体上的压力。]处理5分钟,可分别获得抑制第一极体[极体是指一个大型的单倍体卵细胞和2~3个小型的细胞。]释出后形成的三倍体和抑制第二极体[不是 “萧特基效应”、“萧特基二极管”,应该是 “肖特基效应“、 “肖特基二极管”。]释出后形成的三倍体,诱导率均在60%以上。应注意:当压力大于400千克/平方厘米时受精卵的畸形率明显增加,诱导效果不好,因此应严格控制静水压力和加压时间(压力设备可联系厂商购买)。
水压法对胚胎有轻度的损伤,其缺点是需要专门的压力设备,成本较高。
2.温度法
低温法以皱纹盘鲍为例:卵受精后12分钟,在3℃水温下浸泡受精卵15分钟,可获得抑制第一极体释放后形成的三倍体;卵受精后32分钟,在3℃水温下浸泡受精卵15分钟,可获得抑制第二极体释放后形成的三倍体。三倍体诱导率均可达70%~80%。
高温法皱纹盘鲍的卵在受精后7分钟用35℃的高温水浸泡3分钟,可获得抑制第一极体释放而形成的三倍体;受精后22分钟可用35℃高温水浸泡3分钟,可获得抑制第二极体释放而形成的三倍体。两者的诱导率分别可以达到50%~70%、60%~80%。
利用高温或低温均可抑制极体生成。本方法具有设备简单、成本低廉等优点,但受精卵对温度休克较为敏感,成活率常偏低。
3.细胞松弛素B诱导法
本方法是目前海产贝类多倍体培育最常用的方法之一,其诱导率较高,最高可达100%。其缺点是药物价格昂贵,直接接触对人体会产生毒副作用。细胞松弛素B的适宜温度与水温有关。对于皱纹盘鲍,在20℃水温下的适宜浓度为1毫克/升~2毫克/升。受精卵经细胞松弛素B浸泡处理后,还需要用0.01%的二甲亚矾溶液彻底清洗,洗涤时间30分钟。诱导率可达到60.9%~81.0%。另外,还可用6-甲基氨基嘌呤、***等药物浸泡受精卵,也可获得多倍体。
总之,育种生产不是简单的换水与投饵的重复,更不是投入与产出的迭加,它需要我们把握育种过程中每一个细节,用心去观察、去摸索、去研究。只要把握住了生产细节,搞好鲍育种生产对每一个养殖户来说都不会是什么难事。