广东省珠海市斗门区[斗门区是广东省珠海市的一个市辖区。]白蕉镇[白蕉镇是广东省珠海市斗门区下辖的一个镇。]灯笼村,一笋壳鱼(云斑尖塘鳢)养殖池塘,面积3.5亩,平均水深1.4米,2台1.5kw增氧机[增氧机是一种常被应用于渔业养殖业的机器。](见图1)。2012年6月7日一次性放规格3cm的笋壳鱼2.5万尾,8月11日过到其它塘1.5万尾。
2012年9月17日开始发病[病因作用于机体使疾病发生以后,疾病便作为一个运动发展的过程不断向前演变、推移,经过一定的时间或阶段后,最终趋于结束,这便是发病学(Pathogenesis)所要研究的问题。],刚开始一天死亡1~2尾,发病鱼规格约60克,从9月30日开始严重,每天死亡20~30尾。发病期间用过“鳃皮易康”,并用硫酸铜和“三氯异氰尿酸”杀虫消毒,但均无明显效果。
10月9日下午16:40分到现场检查,测定水温29.5℃。用简易测试盒测水质,pH值8.6,氨氮测不出,**酸盐0.05mg/L。从池中取3尾游水的笋壳鱼,外观其中2尾黑身,另外1尾头部皮肤溃烂,无其它明显病变(见图2)。解剖见鳃略微发白,有出血点(见图3);空肠空胃,胆囊肿大(见图4);脾脏发黑、肿大(见图5);肾脏[肾脏是人体的重要**,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。]肿大(见图6)。分别从病鱼的肝脏和肾脏中接种进行细菌分离培养,并取病鱼的脾脏和肾脏进行**检测和病理切片[取一定大小的病变组织,用病理组织学方法制成病理切片〔通常将病变组织包埋在石蜡块里,用切片机切成薄片,再用苏木精-伊红(H-E)染色〕,用显微镜进一步检查病变。]观察。
结果:从发病鱼的肝脏和肾脏中均分离出大量菌落形态单一的细菌(见图7),革兰氏染色呈*性的短杆菌(见图8),从培养特性和染色初步鉴定为气单胞菌。从发病鱼的脾脏和肾脏均检测出真鲷[真鲷(Pagrus major),硬骨鱼纲,鲈形目,鲷科,真鲷属。]虹彩**[虹彩**科包括许多从昆虫和其它一些动物分离的胞浆型 DNA **。](见图9),病理切片可见肝脏严重水变性、淤血(见图10);脾脏淤血、出血,不见淋巴细胞[淋巴细胞(lymphocyte)是白细胞的一种,是体积最小的白细胞,由淋巴**产生,是机体免疫应答功能的重要细胞成分。],坏死,有肿大细胞(见图11);肾脏有肿大细胞,淋巴细胞散在坏死(见图12),肠有肿大细胞(见图13),鳃有嗜酸性大细胞,其鳃小片增生肿胀(图14)。
1、珠江所王庆等(2010)曾在发病死亡的笋壳鱼体内分离到肿大细胞**属虹彩**,并确定是发病病原,扩增序列与传染性脾肾坏死**(也叫真鲷虹彩**)全长序列的同源性[进化过程中源于同一祖先的分支之间的关系。]最高,为98.8%。本病例中两尾黑身严重的笋壳鱼肝脏、脾脏、肾脏、肠道和鳃中均检出真鲷虹彩**,并从病理组织切片看具有真鲷虹彩**引起组织出现大量肿大细胞和脾肾坏死的致病特征。此外,细菌分离培养,3尾鱼均能分离出菌落形态大小一致的细菌,本病例发病笋壳鱼的死亡原因是真鲷虹彩**和气单胞菌混合感染引起。
2、近2年经常发生笋壳鱼大量发病死亡并用抗菌药物无效的情况,我们也在其它笋壳鱼发病病例中检测到真鲷虹彩**,可能该**对笋壳鱼的危害很大。(利洋研究所雷燕戚瑞荣利洋水产药店白蕉店黄英敬提供2012.10.26)