论文解读--罗湖**可从亲鱼传播至其生殖**和受精卵


今天为大家带来一篇《罗湖**可从亲鱼[亲鱼,指发育到性成熟阶段,有繁殖能力的雄鱼或雌鱼,也叫种鱼。]传播至其生殖**[生殖系统是产生生殖细胞,繁殖后代,分泌性激素维持副性征的**的总称。]和受精卵[受精卵,指的是精卵相会。]》的文献解读,引用信息如下:

小编前期就曾报道过罗非鱼[罗非鱼,俗称:非洲鲫鱼,非鲫、越南鱼、南洋鲫等。]湖**(TiLV)是一种新发现的罗非鱼**,目前在世界上有14个国家的养殖或野生罗非鱼种群中都有罗湖**感染[《感染》 是一部由落合正幸执导的恐怖电影。]的记录,TiLV爆发后可导致20-90%的死亡率。报道发现在一些罗非鱼孵化场,受精卵和罗非鱼的早期发育阶段[是指生物发育过程的阶段划分,特别是指形态、生理、生态等质的差异。]中可以检测到罗湖**,表明该**可能垂直传播。然而,尚不清楚TiLV是否能够从受感染的亲鱼群传播到它们的生殖**和后代。这篇文章研究旨在探讨实验感染的亲鱼能否将**传给其生殖**、卵子、**和受精卵。结果如下:

一、PCR检测罗湖**感染亲鱼和体外受精卵

本研究采用PCR方法检测了罗湖**感染3个罗非鱼家系后亲鱼的组织及其体外受精卵。雌性亲鱼取肝脏、血液、卵巢[卵巢是雌性动物的生殖**,呈葡萄状,均为处于不同发育时期的卵泡,卵泡呈**,卵巢表面密布血管。]和未受精卵,雄性亲鱼取肝脏、血液和**。分别于受精后3、12、64h采集人工受精卵。以同样的方式处理来自两个对照家系的相应样本。表1中总结的结果表明,在实验受到攻毒的鱼类中存在TiLV的全身感染。用PCR方法检测了来自受试家系的全部样本,包括雄性和雌性亲鱼的肝脏、血液、生殖**和未受精卵都呈现TiLV阳性结果。三个感染家系在受精后3、12和64小时后采集的受精卵也呈阳性,但1家系在3和64小时采集的样本除外。来自两个对照家系(4-5)的样本TiLV均为*性(表1)。


二、原位杂交[原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。]揭示TiLV在鱼类组织中的定位

采用原位杂交(ISH)技术,进一步研究TiLV在感染亲鱼肝脏、生殖**和受精卵中的存在,并与未感染TiLV的鱼类家系进行对照。结果如下:
(1)肝脏:使用TiLV特异性探针,发现从6只感染的亲鱼(3只雄性和3只雌性)采集的肝脏样本显示出强烈的ISH反应信号。图2显示了感染亲鱼ISH结果的代表性照片。与H&E染色切片相比,ISH强阳性信号定位于肝脏血管周围区域(箭头,图2c)。在高倍镜下,感染肝细胞[肝脏是由肝细胞组成,肝细胞极小,肉眼看不到,必须通过显微镜才能看到。]的细胞核和细胞质中均可见阳性信号(图2f)。这些肝细胞也显示出退化的迹象,并在其细胞质中积聚脂褐素(棕色)(图2d),而合胞性肝炎的迹象则没有清楚的观察到。


(2)卵巢:通过H&E染色,观察到雌性卵巢中卵母细胞[卵母细胞(oocyte):在卵子发生过程中进行减数**的卵原细胞。]的不同发育阶段(图3)。感染卵巢的结缔组织[结缔组织由细胞和大量细胞间质构成,结缔组织的细胞间质包括液态、胶体状或固态的基质、细丝状的纤维和不断循环更新的组织液,具有重要功能意义。]中可见炎性淋巴细胞、含黑色素的巨噬细胞浸润(图3A、D)。ISH结果与PCR结果一致,发现感染雌性亲鱼的卵巢在卵母细胞不同发育阶段周围的结缔组织中显示出强烈的TiLV阳性信号(图3C,F)。退化卵母细胞也被称为闭锁卵母细胞似乎在其膜上和卵母细胞内具有更强的反应性(图3F)。卵母细胞膜的某些区域也发现TiLV阳性(箭头,图3C,F)。


(3)**
与卵巢相似,用TiLV特异性探针在受感染的雄性罗非鱼亲鱼中所有**样本中检测出阳性信号。阳性信号主要出现在结缔组织和一些类似淋巴细胞的细胞中,特别是在血管周围的组织区域(箭头,图4C,E和G)。精母细胞、**细胞和**区均未检测到阳性信号。


(4)受精卵
结果40-50%的受精卵细胞主要是卵子内检测到的TiLV阳性反应(图5)。


三、细胞系[细胞系(cell line)指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。]培养揭示**活性

该研究还采用E11细胞系传代培养法,对本次实验中的TiLV的活力和感染状况进行了评价。从感染TiLV的亲鱼和对照组亲鱼中采集的血清、肝脏、卵巢、**、受精卵和未受精卵并制备滤液。结果发现E11细胞系中TiLV感染的斑块形成和细胞收缩的典型细胞病变效应(CPE)在接种感染鱼的血清、肝脏、卵巢、**和未受精卵的滤液后的地2-5天清晰可见。图6B清晰可见接种感染TiLV的亲鱼卵巢上清液后E11细胞中的CPE现象。


四、总结

综上所述,本研究表明罗非鱼亲鱼体内感染了罗非鱼**后,**可以通过血液循环系统进入雌雄鱼的生殖**并感染卵子、**和受精卵。因此,为了繁育不含TiLV的种苗,我们应该避免使用感染TiLV的亲鱼进行育种。

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